大肠杆菌里面有质粒吗?

　　质粒，英文为plasmid，性质：原指一切独立于染色体外的遗传因子，但目前一般指微生物细胞中的染色体外遗传因子。它们是能自主复制的共价、闭合、环状的dNa分子，整个质粒通常编码若干个基因。由于质粒的存在往往可以使宿主细胞具有某些性状，而质粒的丢失并不影响宿主在正常条件下的生存。由质粒授予宿主的表型有抗生素耐药性的、产抗生素的、降解芳香族化合物的、产溶血素的、糖发酵的、对重金属耐受性的、产杆菌素的、植物肿瘤诱发的和产硫化氢的。根据质粒的复制类型分为松弛型复制(胞内维持高拷贝数，从几个到几十个)和严聚紧型复制(胞内仅1～3个拷贝)。一部分质粒可通过细菌细胞的接触而转移，使一些对药物敏感的细胞获得对某些药物、金属离子的耐受性或使受体细胞获得另一些特性。在基因重组技术中，有些质粒可用作基因载体。现在应用的载体基本上是在质粒的基础上改造而成的。

　　大肠杆菌正是因为其具备有质粒，且已表达，所以才是现在最重要的基因工程菌。

　　另外更专业的说不能称大肠杆菌，而是大肠埃希氏杆菌，E.coli，因为大肠杆菌在食品检测中指的是一类菌，它本身不是一个分类学名称。

　　大肠杆菌都有质粒吗？

　　一般的话，存在自然界的大肠杆菌自身都带有质粒，质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状，如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等。质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性，与细菌的遗传变异有关。但是大肠杆菌工程菌自身不带质粒。大肠杆菌中存在质粒不一定都具有抗性基因，但有抗性的大肠杆菌一般都与其具有质粒有关。

　　大肠杆菌的质粒位于哪里

　　细胞质中吧

　　大肠杆菌中的质粒是不是只有一种？

　　不是吧，只要有能在大肠中复制的元件的质粒都可以在大肠杆菌中存在

　　大肠杆菌的质粒含有什么基因

　　大肠杆菌有很多质粒，不同质粒携带的“功能基因”是不同的，不可一概而论。人工构建的质粒一般都含有抗性基因，如卡那霉素抗性、四环素抗性、氨苄青霉素抗性等等。

　　什么是大肠杆菌质粒

　　大肠杆菌中提取出的质粒

　　为什么最常用的运载体是大肠杆菌的质粒呢?

　　因为大肠杆菌的遗传背景清楚、各项优势明显。 像最常用的大肠杆菌质粒是pBR322质粒，因为其复制是松弛型（质粒能大量的复制），具有四环素和氨青霉素抗性基因标记（便于筛选），并具有一些便于应用的限制性核酸内切酶位点。

　　大肠杆菌克隆质粒载体有些组织成分，各有什么特点。

　　运载体一般都是DNA，特点是有特定的脱氧核苷酸序列，能够被限制性核酸酶切开，然后倒入需所需的基因

　　表达载体是质粒还是大肠杆菌

　　表达载体 指的是质粒。大肠杆菌是宿主。

　　大肠杆菌中的质粒对其本身有什么作用

　　一般的话，存在自然界的大肠杆菌自身都带有质粒，质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状，如性菌毛、细菌素、毒素和耐性等。质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性，与细菌的遗传变异有关。但是大肠杆菌工程菌自身不带质粒。大肠杆菌中存在质粒不一定都具有抗性基因，但有抗性的大肠杆菌一般都与其具有质粒有关。

　　大肠杆菌中有质粒吗?有胰岛素吗

　　有质粒的,基因工程里用的运载体就是大肠杆菌中的质粒.胰岛素是基因工程完成后的产物

　　大肠杆菌中的质粒是不是只有一种？

　　a、sokmrna能与hokmrna结合，说明这两种mrna的碱基序列互补而不是相同，a错误；

　　b、当sokmrna存在时，hok基因仍能转录，只是转录形成的hokmrna会与sokmrna结合，b错误；

　　c、根据题干信息“转录产生的sokmrna能与hokmrna结合”可知，当sokmrna不存在时，hokmrna才能翻译合成毒蛋白，c正确；

　　d、毒蛋白是由hok基因控制合成的，而hok基因位于大肠杆菌的rl质粒上，因此一个不含任何质粒的大肠杆菌不会被这种毒蛋白杀死，d错误．

　　故选：c．

　　大肠杆菌DH5α可以用来扩增重组质粒，但是它自身带不带质粒？提质粒时是不是一块都提出来了？

　　大肠杆菌DH5α它本身应该是含有质粒的，但是你转进去的重组质粒是你自己已知的质粒和你自己知道DNA片段组成的重组质粒，所以它的大概碱基大小你自己应该知道，所以你提出质粒后，你可以跑回收胶，将你提出的样品全部加入胶孔，还有就是你必须同时跑一个空质粒载体作对照，最后把你的目的重组质粒进行切胶回收。有什么不懂的，可以问我

　　基因工程中选择大肠杆菌作为受体细胞的原因是其中含有质粒,这句话为什么错了？

　　题目中的原因错了。

　　原因：繁殖速度快，可以在短时间内获得要表达的蛋白质或观察到相应性状表现。且相对于其它微生物体积大，便于操作

　　制备感受态的大肠杆菌只是一个空壳？里面没有质粒那些？是这样吗？

　　不是这样的。感受态是指大肠杆菌的细胞膜处于容易吸收外源DNA的状态。大肠杆菌本身的遗传物质DNA还在细胞中，不能是一个空壳。否则，大肠杆菌自身将因为缺乏自己的遗传物质无法繁殖而死亡。后来吸收的重组质粒带有目的基因，但是缺乏大肠杆菌生长繁殖所必须的基因。如果大肠杆菌自己的DNA丢失，就无法分裂繁殖，人工导入的质粒DNA也不会得到表达，就失去了意义。总之，大肠杆菌自身的DNA必须要存在。

　　提质粒时，基因组为什么不会同时被提出来？

　　碱法提质粒时，溶液III加入后就会有大量的沉淀，但大部分人却不明白这沉淀的本质。最容易产生的误解是，当SDS碰到酸后发生的沉淀。如果你这样怀疑，往1%的SDS溶液中加如2M的醋酸溶液看看就知道不是这么回事了。大量沉淀的出现，显然与SDS的加入有关系。如果在溶液II中不加SDS会怎样呢，也会有少量的沉淀，但量上要少得多，显然是盐析和酸变*沉淀出来的蛋白质。既然SDS不是遇酸发生的沉淀，那会不会是遇盐发生的沉淀呢？在1％的SDS溶液中慢慢加入5 N的NaCl，你会发现SDS在高盐浓度下是会产生沉淀的。因此高浓度的盐导致了SDS的沉淀。 但如果你加入的不是NaCl而是KCl，你会发现沉淀的量要多的多。这其实是十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate）遇到钾离子后变成了十二烷基硫酸钾（potassium dodecylsulfate,PDS），而PDS是水不溶的，因此发生了沉淀。如此看来，溶液III加入后的沉淀实际上是钾离子置换了SDS中的纳离子形成了不溶*的PDS，而高浓度的盐，使得沉淀更完全。大家知道SDS专门喜欢和蛋白质结合，平均两个氨基酸上结合一个SDS分子，钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质沉淀了，让人高兴的是大肠杆菌的基因组DNA也一起被共沉淀了。这个过程不难想象，因为基因组DNA太长了，长长的DNA自然容易被PDS给共沉淀了，尽管SDS并不与DNA分子结合

　　50－100 kb大小的片断，没有办法再被PDS共沉淀了。所以碱处理的时间要短，而且不得激烈振荡，不然最后得到的质粒上总会有大量的基因组DNA混入，琼脂糖电泳可以观察到一条浓浓的总DNA条带。

　　一句话,长长的基因组DNA在加入溶液三后被PDS共沉淀了,而我们在这一步后的高速离心后去掉了沉淀,也就去除了基因组DNA.

　　下面的网页可能对你有用,很经典的.

　　(1/2)王镜岩生化书上关于dna的复制和修复有一句话”属于松弛控制的质粒，每个细胞只有一个或少数几个拷...

　　生化书里说的 “每个细胞只有一个或少数几个拷贝”是指的：在同一个细胞内有几个完全相同质粒同时存在的数量，而不是复制多少次。

　　我想你输错了，松弛控制的质粒，每个细胞可以有几十直到几百个拷贝，也就是说，同一个细胞内，有完全相同的质粒几十直到几百个。现在基因工程里常用的大肠杆菌质粒如pUC19等就属于这一类。

　　严谨型的质粒，才只有一个或少数几个拷，比如大肠杆菌的F质粒，在人类基因组中用得很多的BAC质粒就属于这一类质粒。

　　严谨型的质粒的复制，受基因组的复制的调控。而松弛型的质粒不受其调控，也就是在细胞不分裂时，松驰型的质粒还会继续复制，而严谨型的则一般会停止。

　　在适当的宿主细胞内，质粒总是会随着细胞一直不停的复制下去的，所以质粒的复制能力是无限的，因此，生化书里说的是指的在一个细胞内有几个拷贝数，而不是复制多少次。

　　如何将一个质粒dna转入到大肠杆菌感受态细胞中

　　不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞.感受态的大肠杆菌,可以自己制作也可以通过购买.之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的试剂盒,按照试剂盒的说明书操作即可.质粒是带有抗性基因的,只有含有该质粒的细菌才能在含有对应抗生素的培养基中存活并增殖,这样就能确保是你的表达载体质粒.当然为了防止杂菌的污染,整个过程中最好是无菌操作.而表达载体质粒有可能出现突变等情况,所以可以在提出质粒之后,取少量质粒送测序,来确保序列的无误.

　　质粒导入大肠杆菌要用什么处理该菌,以使其处于什么细胞状态,从而吸收DNA分子

　　质粒图一般有三条带，因为提取的质粒有超螺旋，欢型和线性三种形态，三种形态的质粒由于形态的差异在琼脂糖胶电泳的速度有差异，所以会形成三条带。一条很快，离另外两条较远，另外两条很近~

　　提取大肠杆菌DNA为什么不直接提取细胞核中进行提取的DNA而要从细胞质的质粒中提取?

　　基因组DNA可以提取，质粒DNA也可以提取，要看你需要的目的基因是位于基因组上还是质粒上，要哪个部分就提取哪个部分。

　　在基因工程中，质粒是一个非常理想的载体，大部分的目的基因会先导入到质粒中进行扩增，所以提取质粒DNA的情况会经常遇到，这可能给你造成了错觉。

　　怎么判断从大肠杆菌中提取的质粒DNA，是环状的还是线状的？

　　可以在高倍显微镜下观察啊

　　应该是最简单最直接的了额

　　我们上次的实验就是用油镜观察细胞内的染色体形态

　　如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆人的P53基因？并作最终鉴定。

　　就是利用基因工程

　　首先提取目的基因 从细胞的信使RNA中提取出P53基因

　　构建基因表达载体 将目的基因P53和载体-大肠杆菌质粒重组

　　将目的基因导入受体细胞 可以选择大肠杆菌或动植物细胞作为受体细胞，导入重组DNA

　　检测和鉴定 可采用发射性同位素标记法检测P53

　　提取的大肠杆菌质粒里面含有基因组DNA（按照碱法大提质粒）该怎么办？如果没有补救的办法，重新提取应该注

　　可以考虑切胶回收，如果你的质粒在10k以下，污染的基因组DNA量不多，而且基因组DNA弥散不严重的话，在1%的agarose胶里质粒和基因组DNA还是分得比较开的。

　　注意的地方是在加完溶液2裂解细胞的时候要放置在冰上而且时间不能太长，加溶液2以及下一步加溶液3中和时，混合要充分但要轻柔，一般小心颠倒5-10次即可。

　　质粒转化大肠杆菌一般加多少质粒

　　转质粒很好转的，0.1ng甚至0.01ng都够了

　　质粒转化大肠杆菌时一般一个菌株会转入多少个质粒?

　　从概率上讲，一般只有一次，因为你加入的质粒数和细胞数之间比例很小。但不完全排除有两个质粒的情况。

　　质粒转大肠杆菌培养多少时间能长出来

　　这个要看您的质粒是否为常规质粒，如果说您的质粒上含有不利于大肠杆菌生长的基因，要是没有的话常规培养只需要6-12小时以内就可以看到适宜大小的菌落，要是有的话就不好说了，还有就是还会与您培养基中加入的抗生素的种类和数量有一定的关系，建议您咨询师兄或者是师姐更为合适，因为干扰因素太多，无法很确定的回答您，一般是6-12小时

　　为什么大肠杆菌经过质粒转化后铺板后生长的菌落大小

　　大肠杆菌电转化感受态细胞制备 第一天： 1. 将适合菌株（如XL1-Blue, DH5α）置于LB或其他营养丰富的培养基上，在37°C下过夜培养 2. 高温灭菌大的离心瓶（250-500ml）以备第二天摇瓶用 3. 准备几瓶灭菌水（总量约1.5升），保存于冷冻室中以备第二天重悬浮细胞用 第二天： 4. 转移0.2-1ml过夜培养物至装有500ml LB（或其他营养丰富的培养基）的1-2升挡板摇瓶中 5. 37°C下剧烈振荡培养2-6小时 6. 定时监控O.D.600值（培养1小时后每半小时测定一次） 7. 当O.D.600值达到0.5-1.0时，从摇床中取出摇瓶，置于冰上冷却至少15分钟（需要的话这种方式可以存放培养液数小时） 8. 细胞在4°C 5000g下离心15分钟，弃上清液（如需要，沉淀可在4°C的10%甘油中保存一两天） 9. 用灭菌的冰水重悬浮细胞。先用涡旋仪或吸液管重悬浮细胞于少量体积中（几毫升），然后加水稀释至离心管的2/3体积。 10. 照上面步骤重复离心，小心弃去上清液 11. 照上面步骤用灭菌的冰水重悬浮细胞 12. 离心，弃上清液 13. 用20ml灭菌的、冰冷后的10%甘油重悬浮细胞 14. 照上面步骤离心，小心弃去上清液（沉淀可能会很松散） 15. 用10%甘油重悬浮细胞至最终体积为2-3ml 16. 将细胞按150μl等份装入微量离心管，于-80°C保存 转化方法:1. 在冰上解冻电感受态细胞添加1-10μl DNA ，冰上培育约5分钟 2. 添加1-3μl DNA ，冰上培育约5分钟 3. 转移DNA/细胞混合物至冷却后的2mm电穿孔容器（无泡）中 4. 加载P1000，准备好300μl LB 或 2xYT 5. 对电穿孔容器进行脉冲（200 欧姆, 25μFd, 2.5 千伏）（检查时间常数，应该在3以上） 6. 立即添加300μl 的LB或2xYT至电穿孔容器中 7. 37°C下培养细胞40分钟至1小时以复原 8. 转移细胞至适当的选择培养基上培养 大肠杆菌感受态细胞制备及转化中的影响因素

　　如何把质粒转入大肠杆菌中

　　将大肠杆菌与质粒混匀直接在钙离子

　　选择平板上进行转化和筛选，一般仅需2分钟

　　重组质粒在导入受体细胞前转入大肠杆菌是为了什么

　　筛选出符合要求的重组质粒。

　　为什么不是所有的大肠杆菌都成功转入了质粒

　　影响转化效率的因素很多,主要有：感受态细胞制备的质量、受体菌生长期（大肠杆菌在对数生长期易产生感受态）、质粒的大小和构型、所用试剂的纯度、接种前菌种的保藏方式、冰浴时间（延长冰浴时间可略微提高转化率）、器皿的清洁度、化合物及无机离子（Rb+、Mn+、二甲基亚砜能适当提高转化率）、质粒与细胞个数的比例（质粒与细胞个数比例在1:1以下时,转化率随着加入DNA的量增加而呈线性增加）.

　　（1）细胞生长状态和密度.密度不足或过高会使转化率下降.

　　（2）质粒DNA的质量和浓度.用于转化的质粒DNA应主要是共价闭环DNA.转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,量过多货体积过大时,转化率下降.

　　（3）试剂的质量.

　　（4）防止杂菌和其他外源DNA的污染.

　　（5）根据所需质粒DNA的特性,设置相应的选择性培养基进行筛选,有的可能还需进行多补筛选.

　　为什么将重组质粒转移到大肠杆菌中？是因为大肠杆菌分裂速度快吗？分裂这么快，目的基因最后怎么出来？

　　作为受体菌的条件不仅仅是分裂速度快，还要满足结构简单、含遗传物质较少，以便进行目的基因表达鉴定。

　　基因工程中主要侧重于目的基因产物，而不是目的基因。要想获得大量目的基因，通常采用PCR法。

标签：杆菌大肠细胞基因dNa