摘要 详细介绍了小规模提取肝素钠的具体技术，并进行了效益核算。为自主创业提供了一种简捷、方便、快速的发展途径。

　　关键词 肠粘（膜）液；肝素钠；小规模；提取

　　中图分类号 TQ464.5 文献标识码A 文章编号1004-8421（2012）08-961-01

　　肝素钠是一种生物活性物质，广泛存在于猪、牛的大小肠、肝、胰脏等哺乳动物的组织中，目前主要从猪的肠粘膜和肺中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质。肝素钠能够阻止血小板聚集和破坏，妨碍凝血激活酶的形成；阻止凝血酶原变为凝血酶；抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白，达到抗凝血的作用，在治疗血管病方面有独特之处，具有净血脂、防止血栓形成的作用，并对若干肿瘤的癌细胞有抑制和防止转移的作用，有较高的医用价值。

　　随着我国进入老龄化社会，体外循环手术和冠状动脉介入手术需求将出现快速增长，带动相关生产公司的肝素钠销量逐年显著递增及普通肝素钠制剂全球市场容量持续较快增长，直接带动了近几年全球肝素钠原料药（由肝素钠精品制得的半成品）市场容量持续较快增长。过去5年中，全球肝素原料药年复合增长率约为9.35%，有机构预测。2010年至2015年的增长速度更快，年复合增长率预计达到10.32%，到2015年肝素原料药的需求将达50.5万亿单位。

　　1 仪器及药品准备

　　设备仪器：煮池（圆形池底嵌入铁锅），吸附池，搅拌扁（或棒），绞肉机，波美计（比重表），温度计（量程为100℃），滤布网兜，塑料盆、桶、瓢，慢转速搅拌装置（洗衣机马达改装），压榨机，石棉滤布，涤纶细（120目）白布，冷凝管（80 cm），煤或柴，鼓风机。

　　药品：D～204肝素钠离子交换专用树脂，食盐，固体烧碱，盐酸，95%的乙醇，精密pH试纸、广范pH试纸等。

　　2 鲜猪肠粘膜的处理

　　在池底锅内放入新鲜猪肠粘（膜）液，搅拌加热使温度升到30℃，此时按100 kg粘液加入食盐3.5～4.5kg，继续加热到40℃，用40%的烧碱溶液调节pH值到8.8～9，并使温度升至50～55℃，保温4h，注意搅拌。然后升温至90～95℃，停止加热，保温15～20min，捞出浮油，用100目的尼龙滤布过滤，将滤液转入吸附池内。经挤压干的滤渣回锅，加入滤渣量1～1.5倍的4%的氯化钠溶液，搅拌、升温、煮沸，保温1 h，过滤，合并滤液，用于提取肝素钠。整个过程要注意搅拌、控温、防炭化。滤渣可制成饲料添加剂。

　　3 肝素钠的吸附与洗涤

　　将冷却到50～55℃的滤液再除去油脂，调节pH值为9，并保证其pH值为9。每100kg滤液加入处理好的D～204肝素钠离子交换专用树脂11～12.5kg，以70～80转/min的转速搅拌8～9h，使其与离子交换树脂充分吸附，静止15min后过滤，弃滤液。将已吸肝素钠的树脂用清水冲洗至无浑浊、滤干后，用55℃凉开水、约1.5倍树脂的量，搅拌0.5h，过滤，再用6波美度的凉盐开水1.5倍量搅拌洗涤60～80min后，过滤，收集树脂。实践证明6波美度的凉盐水药不会使肝素钠从树脂中洗脱。

　　4 肝素钠的洗脱

　　将经洗涤后已吸附肝素钠的树脂放人20波美度的盐水（用凉开水溶解）中，淹过树脂10cm水面为宜，以70转/分左右搅拌2～3h，过滤收集滤液，待树脂中的肝素钠全部洗脱后，合并滤液。将洗脱后的树脂用20波美度的盐水或pH=2溶液中浸泡保养，下次再用。

　　5 肝素钠粗品的提纯

　　将洗脱液（肝素钠粗溶液）放入沉淀桶内，用酸（或碱）调节pH值为6.5～7.5，用95%的乙醇沉淀肝素钠。以30转/min的速度加入95%的乙醇使之混和均匀，并使乙醇浓度为30波美度，静置24h。吸出上层清液回收乙醇。下层即为肝素钠膏状沉淀，收集于塑料桶、玻璃缸或陶瓷中用酒精淹没，累积后提纯。

　　将累积的肝素钠膏状沉淀用350-400目的尼龙布滤干酒精，用30℃左右、5波美度的盐水30～50倍溶解，用1：1的稀盐酸溶液少量多次地加入，调节pH值为2.5～3.5，过滤除去杂质，加热到40℃再过滤，按此方法再洗1次。滤液用40%的氢氧化钠调节到pH值为7，然后用95%的乙醇加入达50波美度以上，静置24h后用小软管吸出乙醇。将所得沉淀再用95%（或回收的88～90波美度）的乙醇加入脱水，乙醇用量为沉淀体积的2倍或更多，经过5h以上静置，上层乙醇供回收，下层药进行再脱水。将脱水后的沉淀物放在大塘瓷盘上，用水浴法蒸干（防止药品飞溅），也可用200～500W灯泡烘干。所得肝素钠粗品用塑料袋密封保存。

　　6 滤渣的处理与再利用

　　在提纯中所得滤渣累积起来，用30波美度的乙醇浸泡保存，按提纯方法处理、回收再利用。即按1kg滤渣加入10kg1波美度盐水里泡散，用盐酸调pH值为2～3，温度在26～30℃进行过滤去渣，用40%的氢氧化钠慢慢调节pH值为7，再用95%的乙醇加入达50波美度静置沉淀，等候24 h吸出乙醇，沉淀过滤、烘干后还可得低效价的肝素钠粗品。速效最高，药后7d相对防治效果达68.65%。但防治持效性较差，药后21d的平均相对防治效果仅为23.26%，以750倍稀释液防治持效性最好，药后21d为36.67%。

　　3 结论与讨论

　　中药是中华民族的瑰宝，是历经千百年临床应用实际筛选出来的天然产物，从中药寻求抗菌药物无疑有着得天独厚的优势。“同福顺”为一种中药制剂农药，试验结果表明，对茶树炭疽病具有一定的防治效果，防治效果要优于60%L·C杀菌乳油，但较硅唑·多菌灵可湿性粉剂要差，具有较好的防治速效性，但防治持效性较差。

　　“同福顺”中药3种处理浓度中，虽然750倍稀释液速效性稍差，药后7d的相对防治效果要略低于1500倍稀释液，但其防治持续性好，药后14d、21d的相对防治效果均高于1500倍稀释液和1000倍稀释液。因此，“同福顺”中药750倍稀释液为其防治茶炭疽病的最佳浓度。

标签：乙醇树脂